產品及特點：
1. 產品僅用于科研即開即用，用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據伴放線放線桿菌保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
產品名稱 | 致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒在哪里有賣 |
英文名稱 | Pathogenic E.coliPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
運輸及保存：
致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒在哪里有賣低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX（根據機型決定，具體見使用方法）。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，產品僅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設置qPCR反應（20 μL體系，在樣品制備室進行）
10. 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復，則反應設置數量相應增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）：
硫鈰銨英文名稱： Ammonium ceric sulfate其他名稱： Ceric ammonium sulfate產品規格： AR，98%包裝：25克CAS號：18923-36-9CeH16N4O16S4·4H2O=668.58
羥溶液其他名稱： 羥50%水溶液；羥；胲英文名稱： Hydroxylamine solution產品規格： BR，50%包裝：25毫升/100毫升/500毫升CAS號：7803-49-8H3NO=33.03
硫鎂其他名稱： 結晶硫鎂；苦鹽；硫苦；瀉利鹽；七水硫鎂；鐵精礦英文名稱： Magnesium sulfate heptahydrate其他名稱： Epsom salt；Bitter salt e產品規格： 4N包裝：25克產品規格： AR，99%
無水硫鎂英文名稱： Magnesium sulfate其他名稱： Epsom salt產品規格： AR，98%包裝：500克CAS號：7487-88-9MgSO4=120.37
氧化鎂基準試劑，99.9%100克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，中文名稱： 氧化鎂其他名稱： 苦土；燈粉；鍛燒水鎂石；鍛燒鎂氧；鎂氧；輕燒氧化鎂；輕質氧化鎂英文名稱： Magnesium oxide其他名稱： Magnesia usta；Calcined magnesia；Magcal；Maglit產品規格： 基準試劑，99.9%
鎂其他名稱： 偏鎂英文名稱： Magnesium borate monohydrate其他名稱： Magnesiummetaborate產品規格： 納米級，晶須，99.5%包裝：25克產品規格： CP，98.5%
化鎂英文名稱： Magnesium fluoride其他名稱： Afluon；Sellaite產品規格： CP，98%包裝：500克CAS號：7783-40-6MgF2=62.30
氫氧化鎂英文名稱： Magnesum hydroxide其他名稱： Milk of magnesia；Marinco H產品規格： CP，98%包裝：100克CAS號：1309-42-8Mg(OH)2=58.32
致病性大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒在哪里有賣Ethyl benzoylacetate 質量規格：>95%,BR
FORMAMIDINE HYDROCHLORIDE 質量規格：>95%,BR
Vinylmagnesium chloride 質量規格：>95%,BR
2,4-DINITROBENZENESULFONIC ACID SODIUM SALT 質量規格：>95%,BR
3-Aminobenzonitrile 質量規格：>95%,BR
2-Chloro-L-phenylalanine 質量規格：>95%,BR
2-Bromo-4-fluoroaniline 質量規格：>95%,BR
TETRABUTYLPHOSPHONIUM HYDROXIDE 質量規格：>95%,BR
技術特點：
1產品僅用于科研準確可靠，臨床雙盲對照試驗＞1000例，結果與金標準測序法比對，結果*性大于99%。
2高靈敏：可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速：整個檢測流程只需3小時。
4簡便：試劑盒提供預混好的試劑，使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性：雙重特異性組成，保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需*配對，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產物配對，在延伸中產生熒光。
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