原代細胞的分離培養：
原代培養即直接從有機體取下細胞、組織或器官，讓它們在體外維持與生長。原代培養的特點是細胞或組織剛離開機體，它們的生物性狀尚未發生很大的改變，在一定程度上可反映它們在體內的狀態，表現出來源組織或細胞的特性， 因此用于藥物實驗，尤其是藥物對細胞活動、結構、代謝、有無毒性或殺傷作用等，是的工具。常用的原代培養法有組織塊培養法和消化培養法。
（一）組織塊培養法
許多實驗室喜歡用組織塊培養法進行原代培養，因為方法簡單，細胞也較容易生長。尤其是培養心肌，有時還可觀察到心肌組織塊搏動。細胞從組織塊邊緣向外長出并鋪滿培養皿或培養瓶后， 即可進行傳代。
1. 設備材料
培養箱、冰箱、超凈工作臺／無菌間、無菌吸管、離心管、酒精燈、試管架、培養瓶、培養皿、消化液、基礎培養液、胎牛血清、Hanks 溶液、雙抗試液、剪刀、攝子、小燒杯。
2. 操作步驟
（1） 在無菌條件下，取待培養的組織適量，置入小燒杯中， 以適量Hanks 溶液清洗2~3 次，去掉組織塊表面的血污。
（2）用眼科剪將組織塊反復剪成0.5~ 1mm3的小塊。
（3）再用Hanks 溶液反復漂洗， 直至液體不混濁為止。等組織塊下沉，將燒杯傾斜，用小吸管盡量吸除Hanks 溶液。
（4）用含20%滅活血清及雙抗溶液(200U/ml、200μg/ml）的培養液再清洗，用吸管吸干后加入5ml 含20％血清的培養液。
（5）用彎頭吸管吸取組織小塊，均勻地置于培養皿內表面，吸去多余的培養液，各組織小塊之間相距0.5cm 為宜。蓋好培養皿蓋，做好標記， 置37°C 的CO2培養箱內。
（6） 2~4h 后，于超凈工作臺中，緩緩地向培養皿中加入上述含20％血清及雙抗溶液( 100U/ml 及100μg/ml ）的培養液少量，以使組織塊浸沒在培養液中。
（7）輕輕地將培養皿及組織塊移至CO2 培養箱， 如無特殊情況，不必觀察。1~2 周后，可觀察到細胞從組織塊邊緣長出，形成生長暈。
（9） 一般說來，若培養液無明顯改變， 1 周換液1 次即可。待細胞長滿整個培養皿內表面，即可進行傳代培養。
馬脾臟單核細胞
細胞基本屬性：
產品名稱 | 馬脾臟單核細胞 | 組織來源 | 馬脾臟 |
種屬 | 馬 | 生長特性 | 半懸浮生長 |
分離方法 | 通過密度梯度離心法獲得 | 英文名稱 | horse spleen Mononuclear Cells |
貨號 | EY-XY4198 | 規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
細胞鑒定：MO-1或MO-2免疫熒光染色為陽性，細胞純度高于90%
支原體檢測：馬脾臟單核細胞不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
產品規格：5×105cells/T25或1mL凍存管
培養基：馬脾臟單核細胞專用培養基
培養條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：無血清凍存液，液氮儲存
細胞代數：第1代
產品貨期現貨，1周左右
運輸方式T25培養瓶/ 順豐快遞（包郵）
供應限制僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
背景介紹：
單核細胞是血液中大的血細胞，是機體防御系統的一個重要組成部分。與其他血細胞比較，單核細胞內含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強的吞噬作用。它通過吞噬和產生抗體等方式來抵御和消滅入侵的病原微生物。 單核細胞能吞噬異物產生抗體，在機體損傷治愈、抗御病原的入侵和對疾病的免疫方面起著重要的作用。機體發生炎癥或其他疾病都可引起單核細胞總數百分比發生變化，因此檢查單核細胞計數成為輔助診斷的一種重要方法。 |
公司正在出售的產品：
小鼠I型膠原蛋白(COL-1)ELISA試劑盒 ，英文名： COL-1 ELISA Kit
大鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA檢測試劑盒RatN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 96T/48T
人EB病毒(EBv)抗體(IgG)免疫試劑盒 Human epstein-barr virus(EBv)aibody(IgG)ELISA Kit
英文名稱MousereceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligandELISAKit小鼠核因子活化因子受體配體(RANKL)規格：96T/48T
冰凍切片基質金屬蛋白酶(MMP1/8/13)原位明膠酶譜法(insituzymography)熒光染色試劑盒20次
RatangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISA試劑盒大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒規格：96T/48T
小鼠溴脫氧核苷(BrdU)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 大鼠干細胞因子受體(SCFR)ELISA試劑盒
Humanchondroitinsulfate,CSELISAKit 人(CS)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chicken17-ketosteroids,17-KSELISA試劑盒雞17-同類固醇(17-KS)ELISA試劑盒規格：96T/48T
遠西方雜交(FARWESTERNBLOT)印跡消除試劑盒20次
Mousehypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit小鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒規格：96T/48T
馬脾臟單核細胞小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血小板活化因子(PAF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠肌球蛋白(MYS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
操作方法：
組織塊直接培養法（原代細胞培養實驗）
材料與儀器
【動物】選擇大約一半足孕時間的胚胎，10－13天齡胚胎含有最大數量的未分化的間質細胞，成纖維細胞可從這些細胞衍生獲得。每組小鼠胚胎1個【實驗材料】每組的超凈臺中有以下物品：1.50ml配制好的RPMI1640培養液1瓶；8ml小牛血清（FCS)1瓶；100ml 0.25%瓶；PBS(-)1瓶2.100ml滅菌燒杯2個；3、50ml離心筒2個4、滅菌培養皿1個，細胞培養瓶1個5、1ml，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個6、細胞計數板1塊；7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把；8、酒精燈1臺；
步驟
1) 胚胎的分離。適用哺乳動物(倉鼠、小鼠和大鼠)2)將1－2個胚胎轉移至一個小的無菌培養皿中，用新的無菌剪刀小心地絞碎胚胎，用PBS漂洗。3)在無菌狀態下，將絞碎的胚胎轉移于一50ml的無菌離心筒中,加入40ml 0.25％的無菌,用攪拌棒輕輕攪動。4)在溫暖的環境中或置于37°C培養箱中輕輕搖動15分鐘。5)讓存留的組織塊在重力作用下慢慢沉降，將含有懸浮細胞的液體轉移至一無菌50ml的離心管中，該管內按照每10ml上清加入l ml小牛血清的比例加入牛血清以滅活,。6)加人新鮮溶液(見前述步驟)于含有殘留未消化組織塊的原來的50ml離心筒中，重復步驟4和5。7)離心混合的細胞懸液，1200r/rain，5分鐘，棄上清。8)用新鮮的無菌PBS重懸沉淀的細胞，按步驟7再次離心。9)用PBS反復洗滌細胞直至上清清亮為止。
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